钙成像技术指示剂相关介绍

钙成像技术‍能够通过检测神经元内钙离子的浓度变化来达到监测神经元活动的目的,我们一般应用能让钙离子浓度转换成荧光强度的特殊的试剂来实现。根据钙离子指示剂可以分为可见光激发和紫外光激发而根据其工作原理又可以分为比率和非比率型。下面我们就来详细了解一下几种常见的钙离子指示剂。

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1. 紫外光激发探针

钙离子 荧光指示剂是常用的比率型钙离子荧光探针。与其他一代的荧光指示剂相比它们的荧光信号更强对钙离子 的选择性也更强。比率指示剂在与 钙离子 结合后会改变吸收发射特性。而另一种双波长发射指示剂 Indo1相对更容易漂白。

2. 可见光激发探针

与紫外光激发相比可见光激发探针拥有更强的染料吸收能对变化水平检测敏感度也更高。能够降低对活细胞的光毒性和样品自发荧光以及光散射的干扰且无光谱偏移。现在我们使用比较多的此类试剂有Fluo3、Fluo-4以及Rhod2 等,当然这些试剂同时都是非比率型指示剂。

3. 转基因指示剂

随着转基因技术以及光遗传技术的飞速发展,很多基因编码指示剂相继诞生。这类指示剂有个很重要的特征就是可以不依赖于荧光染料就能靶向特定的组织,正因为此它可以可以避免荧光剂带来的的许多问题。是监测活体转基因动物体内钙离子的一个极好的工具。

我们可以根据自身需要选择合适的钙离子指示剂,不论采用哪一类钙离子指示剂总体上成像记录过程是大致相同的,渲染了钙离子指示剂的细胞可以通过荧光显微镜观测,然后我们可以用专用摄像机进行记录捕捉这些钙成像技术‍荧光图像。